人白介素28是由免疫系統(tǒng)細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子,屬于I型干擾素家族。與其他干擾素相比,IL-28在免疫反應(yīng)中起到的作用較為特殊,它參與了抗病毒免疫反應(yīng),尤其是在慢性病毒感染中起到了重要的作用。IL-28通常通過(guò)與其受體IL-28R結(jié)合,激活一系列信號(hào)通路,從而增強(qiáng)抗病毒免疫反應(yīng),抑制病毒的復(fù)制和擴(kuò)散。
Aelisa試劑盒是一種常用的實(shí)驗(yàn)工具,用于檢測(cè)IL-28在體外樣本中的濃度,廣泛應(yīng)用于臨床診斷、免疫學(xué)研究及藥物開(kāi)發(fā)等領(lǐng)域。

1.涂層板:通常為96孔微孔板,表面固定有針對(duì)IL-28的特異性抗體,確保只與IL-28結(jié)合,避免其他物質(zhì)的干擾。
2.標(biāo)準(zhǔn)品:用于生成標(biāo)準(zhǔn)曲線,幫助定量測(cè)定樣本中IL-28的濃度。
3.檢測(cè)抗體:通常是與酶(如辣根過(guò)氧化物酶HRP)標(biāo)記的抗IL-28抗體,用于與樣本中的IL-28結(jié)合。
4.底物溶液:用于通過(guò)酶反應(yīng)生成可見(jiàn)信號(hào)(如顏色變化),反映IL-28的濃度。
5.洗滌液:用于清洗未結(jié)合的成分,確保實(shí)驗(yàn)的特異性和準(zhǔn)確性。
6.樣本緩沖液:用于樣本的稀釋和預(yù)處理。
人白介素28Aelisa試劑盒的使用方法:
1.準(zhǔn)備工作:根據(jù)試劑盒說(shuō)明書(shū),準(zhǔn)備好標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和所需的試劑。所有試劑和樣本應(yīng)在室溫下平衡30分鐘至1小時(shí)。
2.添加樣本:將待測(cè)樣本加入預(yù)先處理好的孔中,注意每個(gè)孔的加入量一般為50µl或100µl,具體按試劑盒說(shuō)明操作。
3.孵育與洗滌:通常在37℃下孵育一定時(shí)間(一般為1小時(shí)),之后用洗滌液清洗孔內(nèi)多余物質(zhì),去除未結(jié)合的蛋白。
4.添加酶標(biāo)記抗體:加入酶標(biāo)記的抗IL-28抗體,再次進(jìn)行孵育。這個(gè)步驟的目的是讓抗體與IL-28結(jié)合,并形成復(fù)合物。
5.底物反應(yīng):加入底物溶液,通常為T(mén)MB(3,3',5,5'-Tetramethylbenzidine),與過(guò)氧化物酶反應(yīng)后,生成藍(lán)色或黃色產(chǎn)物。該反應(yīng)的強(qiáng)度與IL-28濃度成正比。
6.停止反應(yīng)并讀取結(jié)果:加入停止液,停止反應(yīng),并使用酶標(biāo)儀(ELISAReader)在特定波長(zhǎng)下讀取吸光度(OD值)。通過(guò)比較標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算出樣本中IL-28的濃度。